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• 使用 CRISPR 进行基因失活利用了非同源末端连接 (NHEJ)，这是细胞修复双链 DNA 断裂的主要修复过程。学生们可能想知道 CRISPR 如何利用这一过程引起突变。在 NHEJ 过程中，DNA 的断裂末端被连接在一起并重新连接。这个过程很容易出错，因为有时核苷酸会从断裂的末端丢失，并被细胞的修复机制错误地重新添加。如果 DNA 序列被 NHEJ 正确修复，Cas9 将使用向导 RNA 结合到序列上并再次切割 DNA。虽然细胞可以继续修复 DNA，但 Cas9 会继续切割它，直到细胞最终添加错误的核苷酸，这通常会导致基因失去功能。一旦 DNA 序列有错误的核苷酸，Cas9 将不再再次切割它，因为向导 RNA 将不再匹配和结合 DNA。
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