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为SpCas9 经过一个点突变(D10A),此突变会导致Cas9 只能进行单股核酸裁切(SSB)。使用上必须同时引入两段gRNA,辨认邻近的区域( 需要是DNA 双股各一股),造成两个邻近的单股DNA 断裂,才能够引发NHEJ,造成基因缺失,因此可以大幅度降低off-target, 增加专一性。
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