图 1. 体外 repRNA-CoV2S 表征。(A)密码子优化的全长刺突 (S) 开放阅读框,包括 S1-、S2-、跨膜 (TM) 和胞质 (CD) 结构域,对应于 SARS-CoV-2 分离株武汉-Hu-1(GenBank:MN908947.3)中的位置 21,536 至 25,384,与 c 端 v5 表位标签融合,克隆到编码委内瑞拉马脑炎病毒株 TC-83 的 4 个非结构蛋白 (nsP1-4) 基因的 α病毒复制子中。 RNA 转录和加帽后,将 repRNA-COV2S 转染到 BHK 细胞中,24 小时后,使用 (B) 抗 v5 免疫荧光和 (C) 蛋白质印迹法分析细胞,使用恢复期人血清或抗 v5 进行免疫检测。重组 SARS-CoV2 刺突蛋白 (rCoV2-Spike) 和 repRNA-GFP 分别用作阳性和阴性对照。B 和 C 中的数据代表 2 个独立实验。57