然后使用“PEG 方法”将经过验证的 RNP 复合物(由单个 gRNA 和 [ ] 组成)转染到番茄原生质体中,该方法使用聚乙二醇促进 RNP 进入原生质体(Maas & Werr,1989)。进入细胞后,RNP 复合物被运输到细胞核并到达 gRNA 指示的特定目标。一旦达到目标序列,CRISPR-[ ] 酶将在 DNA 中产生双链断裂 (DSB)。当植物细胞修复断裂时,DNA 链中产生的单个断裂将重新连接,有时会导致 DNA 序列的缺失。几天后,RNP 复合物中的 CRISPR-[ ] 蛋白和 gRNA 将被植物细胞分解。