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三光子头式显微镜用于记录神经元活性。他们的技术局限性包括成像深度，改变焦平面时对动物行为的干扰以及在点燃环境中无法形象的成像。klioutch-Nikov，Kerr和同事开发了一个头部安装的三光子激发显微镜，可以在点燃环境中自由移动的小鼠中的所有皮层分辨率以单神经元分辨率进行成像。作者设计了一个轻巧的显微镜，具有远程聚焦，扩展的Z范围和高分辨率。设置允许适当的动物活动能力和头部取向。作者对表达钙指标的神经元进行了成像，并以无标签方法对血管结构进行了成像。他们在几天内对4和6进行了神经元活性的重复测量，并以最小的或没有光漂白或光损伤进行了测量。一个两通道检测器系统使作者能够提高收集效率，从而在暗中和点燃的环境中进行成像，而没有明显的信号检测发生变化，并且在两个条件之间的过渡中没有伪像。第4层和第6层神经元在光线和黑暗环境中具有活性，当光条件切换时，神经元活性稀疏。开发的成像设置可以在自然条件下记录。Elisa Floriddia自然神经科学
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