方法 生成并表征了用 EGFP 标记的强力霉素 (Dox) 诱导的 TP53R273H 和 SV40LT 慢病毒。用这些慢病毒转导从 21 个手术切除的 G1/G2 GEP-NET 原发性或转移性组织中消化的细胞,以产生 Dox 诱导的转基因 PDO (GM PDO)。将用荧光素酶慢病毒转导的 PanNET 的 GM PDO 注入 NSG 小鼠的胰腺中,以产生原位 GM PDO 衍生的异种移植瘤 (GM PDX)。通过 WGS 和 RNA-seq 分析检查了 GM PDO 的遗传和生物学特征,并将其与其原始肿瘤细胞进行比较。通过测量 EGFP 荧光强度来量化在 Dox-on 和 Dox-off 条件下培养的 GM PDO 的细胞生长率。通过生物发光成像监测 GM PDX 的肿瘤生长。通过 IHC 染色测量了 GM PDO 中 Dox 开启和关闭条件下的 NET 标记物 Ki67、p53 (R273H) 和 SV40LT 的表达、其原始肿瘤和 GM PDX。
主要关键词