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胞嘧啶甲基化是原核和真核生物的天然基础修饰,包括通过甲基转移酶酶将甲基添加到胞质嘧啶环的第五碳位置中(1)。在原核生物中,DNA甲基化提供了一种方法,可以通过限制性核酸内切酶保护宿主DNA免受消化的影响,这些核酸内切酶旨在消除外源DNA。DNA甲基化在基因表达的调节/控制中的较高真核生物中的功能(2)。哺乳动物中的大多数DNA甲基化发生在5'-CPG-3'二核苷酸中,尽管确实存在其他模式。发现哺乳动物基因组中所有5'-CpG-3'二核苷酸的所有5'-CpG-3'二核苷酸被发现是甲基化的,而剩下的20%的二十%的二十%二十分位于启动子或最初的基因外显子内。已经证明异常DNA甲基化是癌症中普遍存在的现象,可能是肿瘤发生期间发生的最早变化之一(3)。DNA甲基化也已显示在基因印记,胚胎发育,X染色体基因沉默和细胞周期调节中起着核心作用。能够有效,准确地检测和量化DNA甲基化的能力对于研究癌症,基因表达,遗传疾病以及生物学的许多其他重要方面至关重要。迄今为止,已经开发了许多方法来检测/量化DNA甲基化,包括:高性能毛细管电泳(4)和甲基化敏感的任意启动PCR(5)。但是,当今使用的最常见技术仍然依赖于亚硫酸盐转化率(6)。用硫酸硫酸氢盐处理DNA化学将非甲基化的胞嘧啶修饰为尿嘧啶,甲基化的胞嘧啶保持不变。转换后,可以使用所需的下游应用确定DNA的甲基化曲线。为了进行单个基因座分析,在亚硫酸盐转化率(即Bisulfite PCR)之后,通常会扩增感兴趣的区域,然后对pyrosequencing®进行测序或处理。甲基化检测的最新进展还允许使用包括基于阵列的方法在内的技术,减少表示甲基甲基甲基化(RRBS)和整个基因组Bisulfite测序(7)。

EZ-96 DNA甲基化 - 光泽Magprep

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