CRISPR/CAS系统被发现是一种细菌免疫机制(一种驱除外毒病毒等的机制),而CRISPR/CAS9(近年来一直在世界上使用最广泛的CRISPR/CAS9)来自链球菌为增生链球菌(SPCAS9)。该系统由CAS9,一种裂解双链DNA的酶(内切酶)和一个称为“ Guide RNA(GRNA)”的短RNA分子组成。 GRNA由一个20碱基的序列互补,与位于5'端的目标序列和作为CAS9的支架的序列,当Cas9与脚手架序列结合时,形成了Cas9-grna络合物。为了使CAS9识别目标序列,需要一个称为原始的基序(PAM)的特定序列,将序列与GRNA的5'末端的20个基部互补(在SPCAS9的情况下为NGG),并且需要Cas9-guide RNA与指导rna + p Douplence rebs crement cremence extrent crement crement crements extrest rebists的互补序列的位置结合的位置。 CRISPR/CAS9系统不仅用于切割DNA,而且通过将各种效应子与Cas9蛋白相结合,而CAS9蛋白的DNA裂解活性部分或完全不足,而不需要DNA双链断裂的基因组编辑技术是一个接一个地开发的。 One of these is a technology called Prime editing, in which a fusion protein in which reverse transcriptase is linked to a Cas9 (nickase-type Cas9, nCas9) protein that has partially deficient in DNA cleavage activity and an RNA molecule in which a sequence that forms the template for reverse transcriptase is linked to the 3' end of gRNA, allowing an arbitrary modification to the target gene using RNA as a template.
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