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摘要 人类类器官系统重现了器官的主要特征，为发育生物学和疾病建模提供了平台。组织来源的类器官已被广泛用于研究外在生态位因素对干细胞的影响。然而，由于缺乏有效的基因操作工具，它们很少用于研究内源性基因功能。之前，我们建立了一个人类胎儿肺类器官系统（Nikoli ć 等人，2017 年）。在这里，以这个类器官系统为例，我们系统地开发和优化了一个完整的遗传工具箱，用于组织来源的类器官。这包括“类器官 Easytag”，这是我们通过 CRISPR 介导的同源重组靶向所有类型的基因位点，然后通过流式细胞术富集正确靶向的细胞的有效工作流程。我们的工具箱还结合了使用紧密诱导的 CRISPR 干扰和 CRISPR 激活的条件性基因敲除或过表达，这是这些技术首次有效应用于组织来源的类器官。这些工具将促进组织来源的类器官中的基因扰动研究，促进人类疾病建模，并为许多正在进行的描述性研究（例如人类细胞图谱项目）提供功能对应物。
用于人类组织衍生的功能性遗传工具箱...
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