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可以通过有限稀释从敲除细胞池中分离出单个细胞。虽然有更复杂的方法可以实现单细胞接种(例如流式细胞术),但有限稀释是一种可以用标准移液工具进行的技术。该技术的明显缺点是它依赖于统计概率(基于泊松分布)来将单个细胞沉积到每个孔中。用于有限稀释的典型浓度是每 100 µl 等分试样 0.5-1 个细胞,因为它最大化了获得每个孔的单个细胞的概率,同时最小化了每个孔沉积多个细胞的概率。在这种浓度下,可以预期大约三分之一的孔包含单个细胞,大多数孔是空的。排除没有细胞的孔比分选出由多个细胞产生的异质群体要容易得多。

有限稀释和克隆扩增

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