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在动物和细胞培养中的应用 1. 项目描述:将使用针对 [插入物种] 的 CRISPR 来灭活 [插入基因],以创建 [插入疾病] 的模型。包括 CRISPR 的剂量:病毒载体、质粒、脂质体等。 2. 基因沉默的形式:您是尝试随机还是特定的基因沉默?沉默是一步到位(Crispr/Cas9 和 gRNA 结合在一个载体中)还是两步到位(创建含有 Crispr/Cas9 的细胞系,然后添加 gRNA)或购买含有 CRISPR-Cas9 的预转染细胞系,然后转染 RNA 指导序列? 3. 遏制要求:通常所有涉及非病毒剂量的活动都采用 BSL-1 和化学卫生规范、遏制设备和设施。对于病毒载体 CRISPR,建议采用包括生物安全柜在内的 BSL-2 规范。离心机安全预防措施,用于培养箱和 BSC 之间运输的二级容器。不要用手触摸眼睛、鼻子和嘴巴,以避免粘膜暴露;护目镜或面罩可能有助于实现这一目标。4. CRISPR 注射给药注意事项:应尽量减少使用锐器。强烈建议在动物给药期间使用安全锐器技术。5. 泄漏:如果非病毒载体,请按照化学卫生计划进行清理。如果病毒载体,请遵循 BSL-2 泄漏说明。6. 生物危害废物:收集在双层红色袋子中并在硬质容器中运输。7. 批准的消毒剂:

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