摘要:枯萎综合征(WS)是一种严重的影响鲍鱼haliotis spp。的疾病,是由细胞内人力体类似生物体(WS -RLO)感染引起的。疾病的诊断通常依赖于组织学检查和分子方法的组合(原位杂交,标准PCR和序列分析)。但是,这些技术仅提供对细菌负荷的半定量评估。我们创建了一个实时定量PCR(QPCR)测定法,以根据16S rDNA基因拷贝数识别和枚举鲍鱼组织,粪便和海水样品中WS-RLO的细菌载荷。旨在检测WS-RLO DNA的QPCR分析是根据世界动物健康组织设定的标准验证的。从纯化的质粒稀释液中得出的标准曲线是在7个浓度对数中线性的,效率为90.2%至97.4%。每个反应的检测极限为3个基因拷贝。诊断灵敏度为100%,特异性为99.8%。QPCR分析是巨大的,其高度可重复性和可重现性证明了这一点。这项研究首次表明可以在鲍鱼组织,粪便和海水样品中检测和定量WS-RLO DNA。在各种材料中检测和量化RLO基因拷贝拷贝的能力将使我们能够更好地了解养殖和自然环境中的传输动力学。
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