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6。第7天或更高版本:ELISA评估细胞因子水平。按照制造商的说明执行ELISA。上清液中细胞因子的浓度通常高于商业试剂盒的检测极限,因此需要在制造商指定的稀释缓冲液中稀释样品。对于R&D Duoset Elisa试剂盒,从单核细胞中稀释的稀释剂培训了用B -glucan或bcg训练并在第6天用LPS添加的稀释剂为10 3 –20 3 TNF A和25 3 –100 3 - 100 3稀释3 –100 3以检测IL -6。每个刺激需要优化稀释液,并且在实验室,批次刺激和供体之间可能有所不同。The appropriate controls for the assay are the following: - Non-trained, non-rechallenged cells: No detectable cytokine production - Trained, non-rechallenged cells: No detectable cytokine production - Non-trained, rechallenged cells: High cytokine production - Trained, rechallenged cells: Very high cytokine production

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