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摘要:可以在单氨基酸分辨率下准确测序肽的可扩展方法可以显着提高蛋白质组学研究。我们提出了一种基于肽序列信息的“反翻译”到DNA条形码中的蛋白质测序方法,该方法记录了每个氨基酸的身份,位置和起源肽。我们采用了修改后的EDMAN降解过程,该过程将肽转化为DNA-Barcoded氨基酸,随后通过接近扩展测定法检测到,产生了可以放大和测序的多键型DNA输出。使用我们的方法,我们测序了模型肽中多个连续的氨基酸。此方法还可以使单个氨基酸取代的区分,并同时鉴定翻译后修饰及其在多种肽中的位置。随着进一步的发展,我们预计该方法将使从单分子灵敏度具有高度平行的从头蛋白测序。

通过将肽反向翻译成DNA

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