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2020 年 6 月 16 日 Bernadette Juarez APHIS 副局长 生物技术监管服务部 4700 River Road, Unit 98 Riverdale, MD 20737 主题：确认使用 CRISPR/Cas9 开发的低 PPO 鳄梨不是管制物品 尊敬的 Juarez 女士， JR Simplot 公司的植物科学部门（Simplot）恭敬地寻求生物技术监管服务部的确认，使用 CRISPR/Cas9 开发的低 PPO 鳄梨（Persea americana Mill.）不符合 7 CFR 第 340 部分对管制物品的定义。美国农业部之前已审查了一种树木作物苹果（Malus × domestica）的低 PPO 性状，并确定经过基因改造以降低多酚氧化酶的不变色苹果不太可能对植物造成有害生物风险 1,2。Simplot 已经开发出一种核糖核蛋白 (RNP) 方法，可以将 CRISPR/Cas9 元素递送到植物细胞中。该方法导致目标基因的等位基因内出现双链断裂，并敲除 [ ] Ppo [ ] 中的两个等位基因。最终选定的品系不包含任何来自 CRISPR/Cas9 的引入 DNA。使用此方法，基因编辑是通过用核糖核蛋白 (RNP) 复合物转染鳄梨原生质体细胞来实现的，该复合物由纯化的 CAS9 蛋白与合成向导 RNA (gRNA) 结合而成 (Andersson et al., 2018)。鳄梨不是植物害虫，也不会成为杂草。低 PPO 鳄梨没有引入植物害虫序列，RNP 方法中也没有使用任何此类序列。与传统鳄梨相比，使用 CRISPR/Cas9 开发的低 PPO 鳄梨不太可能成为植物害虫或具有改变的杂草潜力。因此，低 PPO 鳄梨不符合 7 CFR 第 340 条规定的受管制物品的定义。
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