CRISPR-CAS技术提供了彻底改变研究的可编程基因编辑工具。领先的CRISPR-CAS9和CAS12A酶非常适合编程的基因操作,但是,它们受到基因组规模干预措施的限制。在这里,我们利用了一个基于CAS3的系统,该系统具有用于基因组工程的过程核酸酶。使用单个CRRNA编程的最小Cascade-CAS3系统(I型I-C)进行了优化,以产生效率接近100%的缺失,并用于迅速产生含量为7-424 kb的大删除,铜绿铜。相比之下,CAS9产生了小的缺失和点突变。CAS3生成的缺失边界是高度可变的,但通过同源指导修复(HDR)模板成功指定。HDR效率要高得多。最小I-C系统