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摘要：迄今为止，Chlorella dufgaris是食品和饲料添加剂行业中使用的最常用的微藻物种，也被视为可行的生物产品的可行细胞工厂。然而，缺乏有效的基因工程工具使得改善该物种的生理特征很难。因此，基因组编辑等新战略方法的发展正在试图克服许多研究小组中的这一障碍。在这项研究中，使用簇状的定期散布的短腔植物重复序列（CRISPR）相关蛋白9（Cas9）编辑了C. fustgaris utex395的基因组的可能性已被证明可以靶向硝酸盐还原酶（NR）和腺嘌呤磷酸蛋白脂蛋白转移酶（ATP）。基因组编辑的突变体NR和APT是由DNA介导的和/或核糖核蛋白（RNP）介导的CRISPR-CAS9系统产生的，并基于针对氯酸钾或2-含2-磷脂的阴性选择而分离出来。通过通讯蛋白的表达水平或转录本的突变以及特定营养条件下的生长分析证明了编辑基因的无效突变。总而言之，这项研究提供了相关的经验证据，表明CRISPR-CAS9和实用方法在C. vulgaris utex395中进行了基因组编辑的可能性。此外，在生成的突变体中，NR可以在DNA转化过程中提供比使用抗生素的筛查策略更容易的筛选策略。这些结果将是进一步发展C. vulgaris遗传学的基石。
使用CRISPR- ...
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