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抽象的CRISPR-CAS系统通过检测和切割侵入外源DNA，提供对病毒和质粒的适应性免疫的细菌和古细菌。修改版本可以被用作一种生物技术工具，用于在目标基因座上进行精确基因组编辑。在这里，我们开发了一种复制质粒，该质粒构成了CRISPR-CAS9系统，用于在机会性人体病原体肺炎链球菌中进行的ounterselection通过ounterselection进行RNA可编程的基因组编辑。特别是，我们删除了一种方法，用于制作目标无标记的基因敲除和大范围的缺失。引入了精确的双链断裂（DSB）后，将细胞的DNA修复机理（HDR）的DNA修复机理（HDR）剥削以选择成功的转化剂。这是通过将模板DNA碎片转换而成的，该模板DNA碎片会重新组合基因组中并消除对Cas9核酸内切酶靶标的识别。接下来，可以通过在非疗法温度下种植对复制的温度敏感的质量轻松治愈新工程的应变。这允许连续的基因组编辑。使用此系统，我们设计了一个菌株，其中三个主要的毒力因子已删除。此处开发的方法可能会适用于其他革兰氏阳性细菌。
在肺炎链球菌中利用CRISPR-CAS9用于基因组编辑D39V
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