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基因组编辑涉及使用定位的核酸酶(例如锌指核酸酶,Talens或CRISPR/CAS9)切割DNA双螺旋,并在基因组DNA中的靶向,特定序列引入双链断裂(DSB)。实际上是一对成熟的分子剪刀。然后,使用两种机制之一,通过细胞中的机械修复DSB。一种方法是非同源末端连接(NHEJ),其中两个破裂的末端彼此并排并粘合在一起。此方法容易出错,并且由于维修过程中不可避免的错误,在目标裂解位点会导致目标切割部位的插入和缺失(Indels)。这些误差会改变核酸酶目标位点,并防止进一步的切割事件,并通常禁用或敲除基因功能。另一种修复机制是使用同源核酸修复模板的同源指导修复(HDR)。修复模板可以设计与DSB两侧匹配的同源性区域之间进行所需的修改。这可用于引入一系列基因组编辑,从点突变到全基因插入。

基因组编辑的当前状态及其含义

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