CRISPR-Cas9 如何工作?CRISPR-Cas9 系统由一个短的非编码 gRNA 组成,该 gRNA 具有两个分子成分:靶向特异性 CRISPR RNA (crRNA) 和辅助反式激活 crRNA (tracrRNA)。在基因编辑研究中,这些 RNA 通常连接成称为单向导 RNA (sgRNA) 的长结构。gRNA 单元引导 Cas9 核酸酶到达特定基因组位点,Cas9 核酸酶在特定基因组靶序列处诱导双链断裂。在 CRISPR-Cas9 诱导的 DNA 切割后,双链断裂可以通过细胞修复机制使用非同源末端连接或同源定向修复机制进行修复(图 2)。