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病毒是专性病原体，利用宿主细胞机制进行复制。宿主细胞可以识别病毒并激活抗病毒反应。揭示影响病毒感染的因素有助于发现新的候选药物。使用有助于抗病毒免疫反应的特异性免疫激动剂是治疗感染的另一种方法。最近，使用新的综合分子工具（例如成簇的规律间隔的短回文重复序列 (CRISPR) 筛选）研究宿主细胞相互作用并确定开发新抗病毒药物的关键靶标已成为可能。在过去十年中，CRISPR/CRISPR 相关蛋白 (Cas) 系统已被用于基因组编辑。仅当基因组靶标后面跟着一个原间隔区相邻基序 (PAM) 序列（Cas9 蛋白为 NGG，Cas12a 蛋白为 TTTV）时，Cas 蛋白才会使用 II 型 CRISPR 系统中的单向导 RNA (sgRNA) 和 V 型系统中的 CRISPR RNA (crRNA)（为简单起见，在本综述中称为 gRNA）识别靶位点。在识别靶位点后，Cas 蛋白会解开 DNA 链，形成 R 环结构，并切断两条链，导致 DNA 双链断裂 (DSB)。利用位点特异性诱变，已经生成了具有核酸酶钝结构域的 Cas 内切酶变体，称为核酸酶失活 Cas (dCas) 蛋白。dCas 保留了结合目标位点的能力，但不能将 DSB 引入 DNA。将不同的功能域融合到 dCas 蛋白上，可将其转化为具有多种功能的分子“瑞士军刀”，例如单核苷酸编辑和调节转录和表观遗传学 [1]。通过不同的 CRISPR/Cas 系统激活或抑制靶基因转录已被广泛用于破坏单个基因和研究病毒-宿主相互作用 [2]。通过设计和合成数千个针对多个目标基因或基因组中所有基因的 gRNA，可以使用 CRISPR/Cas
CRISPR 筛选：研究病毒的分子工具——...
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