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一种微型 CRISPR-Cas12f 已被证明可作为一种有效的基因组编辑工具，用于革兰氏阴性细菌和人类细胞。在这里，我们开发了一种基于来自 Acidibacillusthiosans 的 AsCas12f1 核酸酶来编辑炭疽芽孢杆菌基因组的替代方法。当选择染色体上的 htrA 基因和质粒 pXO1 上的 lef 基因作为靶标时，CRISPR-AsCas12f1 系统表现出非常高的效率（100%）。同时，大片段删除也观察到较高的效率。我们的结果还表明，供体 DNA 同源臂的长度与编辑效率密切相关。此外，我们还构建了双质粒 CRISPR-AsCas12f1 系统，并与核酸内切酶 I-SceI 结合，用于潜在的多基因修饰。这代表了炭疽芽孢杆菌和其他蜡状芽孢杆菌群细菌的突变菌株构建和基因功能分析的新工具。
通过微型 CRISPR 进行高效基因组编辑......
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