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CRISPR-Cas13 蛋白是 RNA 引导的 RNA 核酸酶,通过与互补的靶噬菌体转录本结合,然后进行一般的非特异性 RNA 降解,来防御入侵的 RNA 和 DNA 噬菌体。在这里,我们分析了 Leptotrichia buccalis 的 LbuCas13a 的防御能力,发现它具有强大的抗病毒活性,不受靶噬菌体基因的必要性、基因表达时间或靶序列位置的影响。此外,我们发现 LbuCas13a 的抗病毒活性对各种噬菌体具有广泛效果,方法是将 LbuCas13a 与来自不同系统发育群的九种大肠杆菌噬菌体进行对抗。利用 LbuCas13a 靶向的多功能性和效力,我们将 LbuCas13a 应用于广谱噬菌体编辑。使用两步噬菌体编辑和富集方法,我们在三种不同的噬菌体中实现了七次无标记基因组编辑,效率高达 100%,包括多基因删除和替换单个密码子等编辑。Cas13a 可用作编辑地球上最丰富、最多样化的生物实体的通用工具。

广谱 CRISPR-Cas13a 可实现高效的噬菌体基因组编辑

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