在使用 CRISPR/Cas9 或其变体进行基因重写时，使用一小段称为引导 RNA 的 RNA 来引导 CRISPR/Cas9（或其变体）到达基因组中想要重写的序列。研究小组首先尝试利用一个在网上公开、任何人都可以访问的程序（CRISPick）2）来筛选出一种有效的向导RNA，然后利用TPN方法重写基因。我们利用TPN法，对在培养的人体细胞中预先导入的特定基因的碱基置换进行修正，并用各种向导RNA测定了改写效率。结果发现，通过CRISPick程序筛选出的向导RNA如预期一样，实现了较高的改写效率。