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CRISPR-Cas9 可以扩大规模,用于培养细胞的大规模筛选,但动物的 CRISPR 筛选一直具有挑战性,因为生成、验证和跟踪大量突变动物的成本过高。在这里,我们介绍了多重混合 CRISPR 液滴 (MIC-Drop),这是一个结合液滴微流体、单针大规模 CRISPR 核糖核蛋白注射和 DNA 条形码的平台,可用于对斑马鱼进行大规模功能性基因筛选。该平台可以有效识别负责形态或行为表型的基因。在一个应用中,我们展示了 MIC-Drop 可以识别小分子靶标。此外,在对 188 个特征不明显的基因进行的 MIC-Drop 筛选中,我们发现了几个对心脏发育和功能很重要的基因。MIC-Drop 具有扩展到数千个基因的潜力,可在模型生物中进行基因组规模的反向遗传筛选。H

MIC-Drop:大规模体内 CRISPR 筛选平台

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