但是,鸡等鸟类每天只能产一个卵子,因此,为了获得一个细胞分裂前的受精卵,即原核合子,必须解剖母鸡并从输卵管中采集,这非常低效。此外,鸟类卵子的蛋黄很大,很难直接显微操作受精卵。因此,为哺乳动物等其他动物物种建立的方法不能用于生产基因组编辑鸡。因此,我们的研究小组决定使用原始生殖细胞(PGC),即生殖细胞的起源(图3)。在鸟类中,PGC在3天大的胚胎的血管中循环,这是其他动物物种中很少见到的独特现象。我们一直在利用从3天大的胚胎中采集的PGC研究鸡的受精机制。利用1号染色体(CM1)的培养技术等,建立了在培养皿中培养PGC的同时进行基因组编辑的方法。将基因组编辑雄性的培养PGC移植到同性的受体胚胎中时,移植的基因组编辑PGC和受体自己的PGC在受体胚胎的睾丸中共存,从而产生生殖系嵌合鸡。生殖系嵌合鸡的睾丸产生来自基因组编辑PGC的精子,通过与野生型雌性交配,可以获得部分目标基因序列杂合缺失的基因组编辑鸡(第一代:G1)。接下来,在性成熟雄性和雌性的G1交配获得的后代中,出现了基因纯合缺失的基因组编辑鸡(第二代:G2)。在纯合缺失的基因组编辑鸡中,目标基因序列的删除会引起移码,从而导致终止密码子的过早出现,从而使基因功能失活并阻止正常的蛋白质产生。