摘要:脂质筏是特定酶和受体所在的液体排序结构域。这些膜平台在各种信号通路中起着至关重要的作用。脂质环境中的改变,例如氧化应激引起的变化,可能会导致膜蛋白的重要功能破坏。细胞膜微阵列已成为研究脂质和膜蛋白在大尺度上的有力方法。基于该技术和液体订购子域的重要性,我们开发了一种新的印刷脂质筏技术,具有保存的天然蛋白质结构和脂质环境。为了验证这项技术并评估其对不同目标的潜力,开发了包含两种不同细胞类型(星形胶质细胞和神经元)的木筏膜微阵列(RMMA)和三种不同的条件(对照状况中的星形胶质细胞,代谢应激和氧化应激)。研究筏结构域之间脂质谱的差异,对RMMA进行了MALDI-MS测定。进行了印刷筏结构域中天然蛋白活性(酶活性和配体结合)的保存,进行NADH氧化还原酶的差异,GAPDH,胆碱酯酶活性以及Sigma-1和Sigma-1和Sigma-2结合测定。我们证明了适合膜亚域的这种新的微阵列技术的性能,可探索与神经病理相关的不同压力条件下脑细胞系的脂质组成和蛋白质活性的变化。■简介
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