碎裂后,将DNA末端修饰以进行下游目标富集,包括最终修复,A尾和适配器连接。修改步骤后,使用Ampure XP珠纯化扩增的DNA样品。用4200贴抽系统和D1000筛选分析确定纯化DNA的尺寸和浓度(图5)。根据30μl的可用体积计算总DNA量。根据Agilent低输入SURESELECT XT人类所有外显子V5方案¹,库应具有225至275 bp的峰值大小。只有两个样品略低于建议的225 bp。以下部分中的杂交协议需要每个扩增的DNA库的750 ng。两个DNA样品略低于建议的总DNA量(图5)。三个样本没有根据大小或定量来满足QC标准,而是通过工作流程处理的,因为自动库的准备不允许排除单个样本。