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诱导降解系统的抽象蛋白质敲低是研究活细胞感兴趣的蛋白质的强大工具。在这里,我们采用了生长素诱导的DEGRON(AID)方法来详细介绍Kaposi与肉瘤相关的疱疹病毒(KSHV)潜伏期相关的核抗原(LANA)在潜伏期维持和可诱导的病毒裂解基因表达中的功能。我们将LANA n末端的微型诱导型脱哥伦斯标签融合了KSHV细菌人造染色体16重组,ISLK细胞被编码女仆的重组KSHV稳定地感染了ISLK细胞。与5-苯基 - 吲哚-3-乙酸孵育,自然生长素的衍生物在1.5小时内迅速降解LANA。与我们的假设相反,单独的LANA耗竭并不能触发裂解重新激活,而是降低了诱导型裂解基因表达时,当我们与ORF50蛋白表达和丁酸钠的组合刺激重新激活时。在没有LANA的情况下,总体裂解基因诱导的降低似乎与KSHV基因组的迅速丧失有关。溶酶体抑制剂氯喹的迅速损失被阻断病毒基因组DNA。此外,siRNA介导的细胞先天免疫蛋白,环状AMP-GMP合酶(CGAS)和干扰素基因(Sting)的模拟器(Sting)以及其他自噬相关基因的模拟器挽救了LANA DEPTETION上病毒基因组DNA的降解。。这些结果表明,LANA会积极防止病毒基因组DNA通过CGAS插入信号轴传感,从而增加了对LANA在潜在基因组维持中的作用的新见解。

压力生物学_健康与疾病中的复杂性和多种多样性

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