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在成人生物体中灭活基因功能的能力对于研究诸如再生和行为等生物学过程至关重要。这是通过工程化等位基因来实现的,该等位基因可以使用CRE重组酶有条件地灭活,然后使用药物诱导的CRE重组酶灭活基因功能。最近的一些研究清楚地表明,工程在斑马鱼中的有条件等位基因的可行性。同时,实现足够程度的重组以诱导完全丧失功能的丧失仍然是一个主要限制。在此,我们通过设计由斑马鱼β-Actin2基因的内含子增强子的斑马鱼泛素启动子组成的重组泛素启动子UBB R来解决这一限制。使用PHIC31介导的靶向集成,我们证明了UBB R在所有胚胎和幼虫阶段测试的UBB R显然均优于父母启动子以及目前可用的无处不在的Creer T2驱动线。此外,我们生成的UBB R:CRER T2驱动线使成人斑马鱼心中的Floxed等位基因几乎完全失活。最后,我们证明了我们的UBB R启动子在其他基因组基因座集成时会保留高活性,从而使其独特地适合于斑马鱼的所有阶段的转基因表达。

在胚胎,幼虫和成年斑马鱼中高效的他莫昔芬可诱导的Cre重组

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