机构名称：
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更深入地了解色谱吸附剂的纳米级和中观级结构以及介质中蛋白质的分布，对于从机制上理解使用这些材料的分离过程至关重要。使用传统技术来表征这种规模的介质结构和其中的蛋白质吸附具有挑战性。在本研究中，我们提出了一种新颖的树脂表征技术，该技术能够在典型的色谱条件下原位测量树脂内吸附蛋白质层的结构。设计并制造了一个石英流通池，用于小角度中子散射 (SANS)，以便在单克隆抗体吸附过程中测量二氧化硅基蛋白质 A 色谱树脂的纳米级到中观级结构。我们能够使用对比匹配方法实时检查不同蛋白质负载和洗涤缓冲液下树脂的孔间（˜ 133 nm）和孔径（˜ 63 nm）相关性以及平面吸附抗体分子（˜ 4.2 nm）相关性。当将 0.03 M 磷酸钠与 1 M 尿素和 10% 异丙醇缓冲液（pH 8）作为洗涤缓冲液引入系统时，它会破坏系统的秩序，导致吸附抗体部分展开，这可以通过平面蛋白质相关性的丧失来证明。该方法为研究色谱树脂内的纳米级结构和配体固定提供了新方法；也许最重要的是了解在复制色谱柱的样品环境中，在不同流动相条件下吸附蛋白质在介质中的原位行为。
蛋白质 A 色谱过程中抗体吸附的原位中子散射
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