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图 1. 多引导 sgRNA 可实现高敲除效率。为三个基因( ALPK3 、 JAK1 、 NUAK2 )设计了三个单引导 RNA,并分别引入(sgRNA1、sgRNA2、sgRNA3)和一起引入(多引导)。平均而言,多引导 sgRNA 的表现分别比 ALPK3 、 JAK1 和 NUAK2 的单个引导 RNA 好 50.8%、32.1% 和 48.2%。通过核转染将核糖核蛋白 (RNP) 转染到 HEK293 细胞(针对 ALPK3 )和 MCF7 细胞(针对 JAK1 和 NUAK2 )。对每个靶标周围的区域进行 PCR 扩增、桑格测序,并使用 CRISPR 编辑推断 (ICE) 分析进行分析。敲除 (KO) 分数是指导致推定敲除(移码诱导插入/缺失和 21+ bp 片段缺失)的序列百分比。

基因敲除试剂盒 v2 - NET

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