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多个基因表达的时间调节是复杂生物现象的基础。然而，用于编程连续遗传扰动的可扩展和通用基因回路架构很少。在这里，我们描述了一种基于模块化重组酶的基因回路架构，包括串联基因扰动盒 (GPC)，通过交替使用两个正交配体进行处理，可以按定义的时间顺序连续表达多个基因。我们使用串联 GPC 顺序表达单向导 RNA，以编码触发突变顺序积累的转录级联。我们构建了一个一体化基因回路，可以顺序编辑基因组位点，在基因表达级联中的特定阶段同步细胞，并出于安全考虑删除自身。串联 GPC 提供了一种多层细胞编程工具，用于模拟多阶段遗传变化，例如肿瘤发生和细胞分化。
可扩展的基于重组酶的基因表达级联
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