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为了分析相关分子的磷酸化/活化模式,用 YHO-1701 和/或伊马替尼、奥希替尼或阿来替尼处理癌细胞 24 小时;然后,使用含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂(Nacalai Tesque, Inc.,日本京都)的 RIPA 缓冲液裂解癌细胞。使用 BCA 蛋白质测定试剂盒(Pierce Chemical Co.,伊利诺伊州罗克福德)测定裂解物浓度,并根据蛋白质负荷进行标准化。然后在 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶上分离裂解物,并转移到聚偏氟乙烯膜上。用一抗在 4 °C 下处理膜过夜。使用辣根过氧化物酶偶联的二抗检测蛋白质

口服药物 YHO-1701 的联合治疗效果......

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