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在过去十年中,转录激活因子样效应核酸酶和基于 CRISPR 的基因组工程彻底改变了我们的生物学方法。由于其高效性和易用性,现在几乎每个实验室都能够开发定制的敲除和敲入动物或细胞模型。尽管如此,产生转基因细胞通常需要一个选择步骤,通常通过抗生素或荧光标记来实现。选择标记的选择基于可用的实验室资源,例如细胞类型,还应考虑时间和成本等参数。在这里,我们提出了一种称为磁激活基因组编辑细胞分选的新型快速策略,根据磁性分选 Cas9 阳性细胞中存在的表面抗原(即 tCD19)的能力来选择转基因细胞。通过使用磁激活基因组编辑细胞分选,我们成功生成并分离了基因改造的人类诱导多能干细胞、原代人类成纤维细胞、SH-SY5Y 神经母细胞样细胞、HaCaT 和 HEK 293T 细胞。我们的策略扩展了基因组编辑工具箱,提供了一种快速、廉价且易于使用的替代现有选择方法的方法。

基因组编辑细胞的简化选择方法

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