嵌合抗原受体 (CAR) T 细胞疗法在过去十年中已被证明是癌症治疗的突破，在对抗血液系统恶性肿瘤方面取得了前所未有的成果。所有获批的 CAR T 细胞产品以及许多正在临床试验中评估的产品都是使用病毒载体生成的，以将外源遗传物质部署到 T 细胞中。病毒载体在基因传递方面具有悠久的临床历史，因此经过了反复优化以提高其效率和安全性。尽管如此，它们半随机整合到宿主基因组中的能力使它们有可能通过插入诱变和关键细胞基因失调而致癌。CAR T 细胞给药后的继发性癌症似乎是一种罕见的不良事件。然而，过去几年记录的几起案例使人们关注到这个问题，鉴于 CAR-T 细胞疗法的部署相对较晚，这个问题迄今为止可能被低估了。此外，在血液系统恶性肿瘤中获得的初步成功尚未在实体瘤中复制。现在很明显，需要进一步增强以使 CAR-T 细胞增加长期持久性，克服疲惫并应对免疫抑制肿瘤微环境。为此，各种基因组工程策略正在评估中，大多数依赖于 CRISPR/Cas9 或其他基因编辑技术。这些方法可能会在产品细胞中引入意外的、不可逆的基因组改变。在本综述的第一部分，我们将讨论用于生成 CAR T 细胞的病毒和非病毒方法，而在第二部分，我们将重点介绍基因编辑和非基因编辑 T 细胞工程，特别关注其优势、局限性和安全性。最后，我们将严格分析不同的基因部署和基因组工程组合，为生产下一代 CAR T 细胞制定具有卓越安全性的策略。