使用偏振滤波来最大化信噪比 (SNR),尽管使用低激发功率,但仍能获得良好的组织成像深度。然而,在将血管结构与髓鞘轴突进行比较时,内在信号可能会出现一些模糊性。上述工作通过结合分子成像(例如第三谐波产生 (THG))解决了这种矛盾。在眼科成像领域,有大量关于相位对比有助于识别细胞界面的研究。Sulai 等人以标准自适应光学扫描激光检眼镜 (AOSLO) 成像装置为基础,将相位对比附加到 AOSLO 系统中。8 显微镜点扩展函数的横向分离增强了整体对比度和检测系统微特征的能力。9 此后,再也没有在大脑中研究过类似的方法。然而,使用 NIR-II 光谱范围会减少光的散射,这可能有助于实现相位对比成像,如果应用于反射共聚焦显微镜设置,将会大有裨益。在没有飞秒源产生 THG 的情况下,血管造影可以从类似于光学相干断层扫描 (OCT) 中的散斑分析的技术中受益。基于信号的高频时间滤波,OCT 能够在体内检索红细胞路径。10 类似于 NIR-II 反射共聚焦显微镜的方法可以帮助区分皮质组织中的轴突和血管。在本研究中,我们调查了相位对比方案与 NIR-II 反射共聚焦显微镜的结合是否可以为细胞(包括管腔中的红细胞)提供内在对比。这项研究将表明,将这种成像装置与高频时间滤波相结合,可以证明是一种有效的框架,可以检测微血管网络结构(或血管结构),并区分皮质中具有流动的动态元素(如血管)和静态元素。我们的报告描述了成像装置、动态结构成像方法和体内测试,其中小鼠的头骨保持完整,以测试定制显微镜的功能。
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