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背景：GLUT4 在胰岛素或运动刺激下促进脂肪细胞和骨骼肌吸收葡萄糖，在维持葡萄糖稳态方面发挥着至关重要的作用。GLUT4 运输中断是 2 型糖尿病的标志，与肥胖有关。1 目前研究 GLUT4 的技术主要依赖于 GFP-GLUT4 融合蛋白的表达 2 或抗体的使用。3 尽管如此，GFP 融合蛋白不适合研究 GLUT4 的亚群，而基于抗体的方法存在特异性问题，通常仅限于固定组织。缺乏标记内源性 GLUT4 和识别其在各个区室中的相互作用伙伴的工具，阻碍了对其运输和调节的理解，并限制了为治疗目的而调节其分布的策略的发展。配体引导的两步标记提供了一个平台，可以以极好的特异性标记内源性 GLUT4，同时保留其功能（图 1a）。该方法可以标记目标蛋白 (POI) 的亚群，之前曾用于研究神经元中的 AMPA 受体运输。4 我们的实验室在设计、合成和应用类似的配体定向标记探针方面拥有丰富的经验。我们建议采用这种技术标记内源性 GLUT4，以研究其运输并绘制其相互作用组图。
配体导向两步标记：一种绘制贩运图谱的新技术
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