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摘要:顶复门寄生虫新孢子虫是全球范围内导致牛流产和死胎的主要原因。通过删除毒力基因 actA 、 inlA 和 inlB ,设计出减毒突变单核细胞增生李斯特菌菌株 (Lm3Dx),以避免全身感染并将载体靶向抗原呈递细胞 (APC)。插入编码新孢子虫主要表面蛋白 NcSAG1 的 sag1 ,产生疫苗菌株 Lm3Dx_NcSAG1。评估 Lm3Dx_NcSAG1 的有效性的方法是,将 1 × 10 5、1 × 10 6 或 1 × 10 7 CFU 的 Lm3Dx_NcSAG1 接种到雌性 BALB/c 小鼠体内,每隔两周进行三次肌肉注射,然后在怀孕第 7 天用 1 × 10 5 个高毒性 NcSpain-7 菌株的犬新孢子虫速殖子进行攻击。观察到剂量依赖性保护作用,用 1 × 10 7 CFU 的 Lm3Dx_NcSAG1 治疗的组的出生后后代存活率为 67%,而未接种疫苗的对照组的存活率为 5%。在安乐死时(产后 25 天),接受两个较高剂量的组的 IgG 抗体滴度显著降低,接种组的脾细胞培养上清液中的细胞因子回忆反应(IFN-γ、IL-4 和 IL-10)增加。因此,Lm3Dx_NcSAG1 在怀孕的新孢子虫病小鼠模型中诱导与平衡 Th1/Th2 反应相关的免疫保护作用,应在反刍动物模型中进一步评估。

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