马卵母细胞和胚胎的基因操作
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由于标准体外受精技术在马身上尚不可行,因此人们已使用多种不同技术来制造马胚胎用于研究。其中一种方法是孤雌生殖,即在没有引入精子的情况下诱导卵母细胞成熟为胚胎状状态,因此它们不被视为真正的胚胎。另一种方法是体细胞核移植 (SCNT),即将现存马的体细胞核插入去核的卵母细胞中,从而产生供体马的遗传克隆。由于美国马卵母细胞供应有限,研究人员已研究将马体细胞核与其他物种的卵母细胞相结合以制造用于研究的胚胎的可能性,但迄今为止尚未成功。人们对使用暴露于外源 DNA 的精子生产转基因动物的兴趣也日益浓厚。成功创建转基因马胚泡表明精子介导基因转移 (SMGT) 具有良好的前景,但这种方法并不适用于基因治疗等其他应用,因为它不能用于诱导靶向突变。这就是 CRISPR/Cas9 等技术至关重要的原因。在这篇评论中,我们认为孤雌生殖、SCNT 和跨物种 SCNT 可以被视为基因操作策略,因为它们可以产生与亲本细胞基因相同的胚胎。在这里,我们描述了这些方法的执行方式及其应用,还描述了用于直接修改马胚胎的几种方法:SMGT 和 CRISPR/Cas9。

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