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CRISPR/Cas9 基因组编辑系统的效率在许多作物中仍然有限。利用强启动子来提高 Cas9 的表达水平是提高编辑效率的常用方法。然而，这些策略也增加了脱靶突变的风险。在这里，我们开发了一种新策略，利用内含子介导增强 (IME) 辅助的 35S 启动子来驱动 Cas9 和 sgRNA 在单个转录本中，通过适度增强 Cas9 和 sgRNA 的表达来提高编辑效率。此外，我们开发了另一种策略来富集高表达 Cas9 /sgRNA 的细胞，通过共表达发育调控基因 GRF5 ，这已被证明可以提高转化效率，并且来自这些细胞的转基因植物也表现出增强的编辑效率。该系统将莴苣（Lactuca sativa）中三个目标的基因组编辑效率从 14–28% 提高到 54–81%，且脱靶编辑效率没有增加。因此，我们建立了一种新的基因组编辑系统，该系统大大提高了目标编辑效率，且没有明显增加脱靶效应，可用于表征莴苣和其他作物中的目标基因。
在不牺牲特异性的情况下在生菜中建立有效的基因组编辑系统
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