6 Centro de Investigación de Estudios Avanzados del Maule, Universidad Católica del Maule, 3480112 Talca, Chile Oocyte maturation or the acquisition of meiotic competence requires a controlled expression of proteins that supports this process in preparation for fertilization.两者均由高度调节的离子稳态确定卵母细胞的成熟和受精。几个离子通道,调节多种细胞过程,据报道在包括哺乳动物在内的不同物种的卵中表达。受精始于成熟卵母细胞中的精子 - 特异性磷脂酶(PLC)。Ca 2+流入需要在卵母细胞中积聚Ca 2+以准备受精,并在受精过程中补充其细胞内存储,从而支持Ca 2+振荡和卵子激活。卵子激活包括在其他过程之间形成前核,皮质颗粒外胞菌病,多植物的封闭性和减数分裂II,以支持向早期胚胎发育过渡的其他过程。电压门控活化的钙通道Cav3.2通道已被表达,并有助于对钙储存的补充,以准备小鼠卵中的受精。此外,已经显示出在小鼠卵中表达的阳离子非选择性通道TRPV3的瞬态受体通道TRPV3(一种阳离子非选择性通道),但是其生理功能目前尚不清楚。在这里,我们表明TRPV3和CAV3.2在小鼠卵中功能相互作用。使用缺乏TRPV3和CAV3.2蛋白的卵,我们评估它们在皮质颗粒分布中的作用。方法:使用KO动物模型,共焦显微镜,生物信息学和斑块钳电生理学,我们测试了离子通道在小鼠卵中的表达和功能,并评估了它们在皮质颗粒动力学中的作用。结果:TRPV3KO卵中的Cav3.2 -20 mV时的Cav3.2电流显着降低(8pa/pf wt卵,trpv3ko卵中的3,75 pa/pf)。TRPV3电流(41 pa/pf在wt中为41 pa/pf,而在cav3.2ko卵中的30,5 pa/pf)。trpv3ko卵显示,与WT卵相比,标记为透镜culinaris凝集素的荧光强度测量的质膜中的CG密度显着降低。生物信息学方法揭示了CAV3.2和TRPV3蛋白之间物理相互作用的可能位点/残基。我们的结果表明,Cav3.2和TRPV3的功能和/或物理相互作用可能将关键细胞过程调节为皮质颗粒分布,在哺乳动物中卵向胚胎过渡的基础。致谢:Fondecyt 1221308; Fondequip Anid EQM200122
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