修改,例如疾病突变建模或体细胞基因治疗中突变的校正。为了加强精确的基因编辑,需要工具或干预措施使 DSB 修复途径选择偏向 HDR,并通过将 DNA 修复模板靶向递送到 DSB 来促进 HDR 处理。特别是修复模板的可用性可能是 HDR 的限速因素。以前用于靶向递送修复模板的方法使用 Cas9 融合蛋白,其结构域与功能基团结合,该功能基团被掺入合成寡核苷酸或 PCR 片段中作为供体模板,并作为组合的 Cas9-sgRNA-供体复合物递送到细胞中 [3-5]。然而,目前尚不清楚修复模板分子与 Cas9 核酸酶的连接是否是共递送的最有效方式,因为模板在 DSB 修复的后续步骤中是必需的。以前促进 DSB 修复途径选择的方法有利于