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尽管CRISPR-Cas9技术在大豆遗传改良中得到了迅速应用,但是由于经典的PAM(protospacer vicinity motif)的限制,很难实现大豆复杂基因组中特定位点的靶向编辑。本研究开发了一种由SpRY介导的无PAM大豆基因组编辑系统。通过对大豆代表性农艺性状目标进行靶向编辑并评估结果,证明SpRY蛋白可以在大豆的宽松PAM位点实现高效的靶向诱变。此外,基于SpRY的胞嘧啶碱基编辑器SpRY-hA3A和腺嘌呤碱基编辑器SpRY-ABE8e均能分别精准地诱导大豆C到T和A到G的转换。因此,我们的数据表明SpRY工具箱可以以无PAM的方式编辑大豆基因组序列,突破了大豆基因组编辑技术系统中限制性的PAM障碍。更重要的是,我们的研究丰富了大豆基因组编辑工具,对大豆育种中的精准编辑和分子设计具有重要的实际应用价值。

利用 CRISPR-SpRY 推进大豆无 PAM 基因组编辑

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