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抽象的干细胞，特别诱导的多能干细胞（IPSC），对再生医学和治疗治疗的未来有希望。最近，使用Talens和CRISPR来实现基因组工程目的和疾病模型的产生，已经实现了干细胞和祖细胞的操纵。但是，缺乏先进的技术一直在阻碍目前的研究和发现速度。改善的分娩可以帮助加速研究新疗法，并有助于理解疾病途径和机制。我们已经证明了lipofectamine®3000是改进的DNA递送试剂，可以实现胚胎干细胞（ESC）和IPSC中各种质粒DNA的最佳转染效率，这些质粒DNA和IPSC在传统上很难转发。替代DNA，mRNA的转染要求货物仅进入细胞质，而不是细胞核，因此降低了整合的风险，更重要的是大大提高了转染效率。在最近的一项研究中，我们在胚胎干细胞和IPSC中使用了一种特异性递送试剂Lipofectamine Messengermax™，并在Cas9-MRNA和GRNA复合物中显示了成功的遗传裂解。与质粒CAS9方法相比，CAS9 RNA方法的核酸酶介导的百分比率提高了。最近，我们已经表明，提高的indel速率直接改善了多路复用的靶向并减少脱靶效应。CAS9 RNP复合物可以在细胞进入时立即起作用，因为不需要转录和翻译。新开发的工作流程，由cas9-核糖核蛋白和专门开发的转染试剂Lipofectamine crisprmax™组成，可在Jurkat T细胞和IPSC中产生超过80％的Indel率。此外，该复合物可以从细胞中迅速清除，从而最大程度地减少了脱靶裂解事件的机会。将这些进步综合起来大大改善了下游工作流程，可以更轻松地进行干细胞操作，并增强敲入或敲除细胞模型和转基因小动物模型的产生。引言患者衍生的IPSC通过使能够进入活体供体无法获得的细胞群体，从而在细胞疗法和体外疾病建模中提供了令人兴奋的潜力。随着最近发现特定基因编辑的发现，这种真正的力量即将快到。除了特定于站点的编辑外，具有开发两个具有等基因背景的细胞模型的能力，使研究人员具有研究途径或综合征中单个突变的真实影响的潜力，进而开发了先进的疗法和治疗方法。
基于CRISPR的基因组编辑 - 茎 - disease-model- ...
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