胞嘧啶和腺苷碱基编辑器(CBE和ABE)在植物中得到了广泛的应用,极大地促进了基因功能研究和作物育种。目前的碱基编辑器可以实现高效的A到G和C到T/G/A的编辑。然而,高效且可遗传的A到Y(A到T/C)编辑仍有待在植物中开发。本研究构建了一系列适用于单子叶植物和双子叶植物的A到K碱基编辑器(AKBE)系统。此外,用无PAM的Cas9变体(nSpRY)替换nSpCas9,以扩大AKBE的靶向范围。利用 18 个内源基因座上的 AKBE 编辑的 228 株 T 0 水稻和 121 株 T 0 番茄植物的分析表明,除了高效的 A 到 G 替换(平均 41.0%)之外,植物 AKBE 还可以实现 A 到 T 的转换,在水稻和番茄中的效率分别高达 25.9% 和 10.5%。此外,水稻优化的 AKBE 在水稻中产生 A 到 C 的转换,平均效率为 1.8%,揭示了植物优化的 AKBE 在创造遗传多样性方面的重要价值。虽然大多数 A 到 T 和 A 到 C 的编辑是嵌合性的,但所需的编辑类型可以传递给 T 1 后代,类似于传统 ABE8e 产生的编辑。此外,利用AKBEs靶向酪氨酸(Y,TAT)或半胱氨酸(C,TGT)实现了引入靶基因的早期终止密码子(TAG/TAA/TGA),展示了其在基因破坏中的潜在用途。