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在单分子,实时(SMRT)测序中,通过单个DNA聚体在DNA链复制过程中实时监测单个核苷酸,跟踪掺入multicolor荧光标记的核苷酸。[3A]通过扩散过程将要测序的DNA模板加载到100 nm直径的纳米线的底部,称为零模式波导(ZMW),这自然有利于捕获由于井的大小约束而捕获较短的DNA分子。[3b,4]为了从长片段中获取读数,使用尺寸选择系统,其中短片段通过凝胶电泳去除。[5]总体而言,在SMRT测序方案中需要高输入DNA量(> 3 µg每1 GB基因组),[5,6],尽管可提供来自亚纳米图DNA的库制备方法[7] [7]来自低输入的这种低输入量的DNA负载限制可有效读取来自低输入的有效读数。需要新平台有效地将各种尺寸的DNA碎片加载到没有长度偏差的ZMW中,并且从超值输入(PICOGRAMPOMPOM级别)导致了几种类型的电气致命ZMW的发展,包括纳米孔ZMWS(NZMWS)(NZMWS)[8]和POOL ZMWS(POOL ZMWS)(POROUL ZMWS(POLOUL ZMWS))(POROUL ZMWS)(POLFOOL ZMWS)。[9]在这些设备中,跨设备的电压应用导致离子流过ZMWS的多孔碱基,从而导致电动介导的生物分子(DNA,RNA和蛋白质)的电动介导的负载。与基于扩散的负载相反,电力学介导的负载功能低尺寸偏差和亚纳米革兰氏DNA输入要求。在该设备中,波导在其底部嵌入了电极,可以使电压诱导的DNA分子捕获到EZMWS中。但是,这些设备都依赖于独立的超薄膜,这在某种程度上承诺了设备的寿命并增加背景光致发光。为了克服这些问题,我们在这里脱颖而出,电光ZMWS(EZMWS),这是一种新型的电气可致动ZMW的设计,其中不需要独立的membranes。我们的新设备功能

通过电流零模式波导直接测序对DNA片段的快速识别

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