基因组编辑技术,例如成簇的规律间隔短回文重复序列/CRISPR 相关系统 (CRISPR/Cas9),无疑正在成为改良粮食作物和应对农业挑战不可或缺的工具。在本研究中,评估了影响转化效率的关键因素,例如 PEG4000 浓度、孵育时间和质粒量,以实现将 CRISPR/Cas9 载体有效递送到卷心菜原生质体中。使用扩增子测序,我们证实了 PEG4000 浓度和孵育时间对诱导的目标突变有显著影响。通过优化转化方案,以 40 µg 质粒和 50% PEG4000 孵育 15 分钟,实现了 26.4% 的编辑效率。虽然这些因素强烈影响突变率,但转化原生质体的活力仍然很高。我们的发现将有助于成功编辑卷心菜和其他芸苔属植物的基因组,也有助于依赖原生质体瞬时转化方法的基因功能分析和亚细胞定位等研究领域。