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摘要：当前的 SARS-CoV-2 大流行对全球健康造成了重大负担。尽管有保护性疫苗可用，但随着新的病毒变种不断出现，人们的担忧仍然存在。基于 CRISPR 的基因编辑方法提供了一种有吸引力的治疗策略，因为 CRISPR-RNA (crRNA) 可以快速调整以适应新的病毒基因组序列。本研究旨在利用 RNA 靶向 CRISPR-Cas13d 系统攻击病毒 RNA 基因组中高度保守的序列，从而为未来其他冠状病毒的人畜共患疫情做好准备。我们设计了 29 个 crRNA，以靶向整个 SARS-CoV-2 基因组中高度保守的序列。几种 crRNA 显示出有效沉默具有匹配病毒靶序列的报告基因并有效抑制 SARS-CoV-2 复制子。抑制 SARS-CoV-2 的 crRNA 也能够抑制 SARS-CoV，从而证明了这种抗病毒策略的广度。令人惊讶的是，我们观察到，只有针对正基因组 RNA 的 crRNA 在复制子测定中表现出抗病毒活性，而那些结合负基因组 RNA（复制中间体）的 crRNA 则相反。这些结果表明 SARS-CoV-2 基因组的 +RNA 链与 − RNA 链在脆弱性和生物学方面存在重大差异，并为 RNA 靶向抗病毒药物的设计提供了重要见解。
基于 CRISPR-Cas13d 的有效抗病毒策略可对抗 SARS-CoV-2
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