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摘要:天然质谱法(NMS)筛选天然聚糖库针对聚糖结合蛋白(GBPS)是配体发现的强大工具。但是,由于血糖浓度未知,因此不能直接从天然文库中测量亲和力。在这里,我们引入了依赖性(硬币)-NMS,通过利用在纳米流电喷雾电离发射器内的溶液的缓慢混合来实现自然聚糖库的定量筛选。通过对时间依赖性相对丰度变化的NMS分析,同时确定了检测到的GBP-聚糖相互作用的亲和力(K d)。我们使用具有已知K D值的纯化聚糖和GBP之间的相互作用来建立硬币-NMS的可靠性。我们还使用用于糖基化GBP的捕获和释放(CAR)-NMS分析来证明硬币-NMS。与含有数百种N-聚糖和糖肽的天然文库获得的植物,真菌,病毒和人类凝集素获得的硬币 - 核NMS结果突出了该测定的多功能性,以发现新的配体,可精确测量其亲属,并揭示“好”的特殊性。值得注意的是,硬币-CAR-NMS结果阐明了SARS-COV-2受体结合结构域的唾液酸结合特性,并确定了单溶解的杂种和二胞质N-聚糖的识别。此外,宿主复合物n-聚糖的药理耗竭可降低伪型病毒体和SARS -COV -2细胞的进入,这表明复杂的n-聚糖可以用作附着因子。■简介

使用非浓度独立(COIN)天然质谱法

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